Wat ELISA-kits gebruiken

ELISA is gebaseerd op het stollen van antigenen of antilichamen en enzymmarkers van antigenen of antilichamen. Antigenen of antilichamen gebonden aan het oppervlak van de vaste-fasedrager behouden nog steeds hun immunologische activiteit, en enzym-gelabelde antigenen of antilichamen behouden zowel hun immunologische activiteit als hun enzymactiviteit. Tijdens de bepaling reageert het onderzochte monster (het antilichaam of antigeen daarin) met het antigeen of antilichaam op het oppervlak van de vaste-fasedrager. Het antigeen-antilichaamcomplex dat op de vaste-fasedrager wordt gevormd, wordt door middel van een wasmethode gescheiden van andere stoffen in de vloeistof. Het antigeen of antilichaam, waaraan vervolgens enzymmarkers worden toegevoegd, wordt door reactie ook in de vaste fasevector gecombineerd. Op dit moment is de hoeveelheid enzym op de vaste fase evenredig met de hoeveelheid van de onderzochte stof in het monster. Na het toevoegen van het substraat van de enzymreactie wordt het substraat door het enzym gekatalyseerd als een gekleurd product. De hoeveelheid product houdt rechtstreeks verband met de hoeveelheid onderzochte stof in het monster, dus het kan een kwalitatieve of kwantitatieve analyse zijn afhankelijk van de kleurdiepte. Door de hoge katalytische efficiëntie van het enzym worden de resultaten van de immuunrespons indirect vergroot, wat de meetmethode zeer gevoelig maakt.

ELISA kan worden gebruikt om zowel antigenen als antilichamen te bepalen. Er zijn echter veel factoren die de resultaten van het Elisa-experiment beïnvloeden, dus het versterken van de kwaliteitsborging van elke schakel kan de methodologische voordelen ervan ten volle benutten.