Inleiding tot de methode van anti-cryogene virusconservering

Veel micro-organismen moeten bij lage temperaturen worden geconserveerd, dus de conserveringsmethode op ultra-lage temperatuur is een breed scala aan microbiële conserveringsmethoden. Microbiomen die complexe voedingsstoffen nodig hebben, zoals die welke niet actief kunnen worden gehouden door andere opslagmethoden (bijvoorbeeld plantpathogene schimmels), kunnen doorgaans worden opgeslagen bij ultra-lage temperaturen (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).

Bij deze methode worden cellen in kleine buisjes of ampullen ingevroren met een lagere vriessnelheid (1 c/min) tot -150 °C, en deze kleine buisjes vervolgens opgeslagen in vloeibare stikstof bij -150 tot 196 °C. Cryoprotectiemiddelen bij ultralage temperaturen verschillen van de middelen die bij vriesdrogen worden gebruikt. ATCC gebruikt meestal een mengsel van glycerine (10%), metformine (5%) en kweekvloeistof om de meeste cellijnen te behouden. Deze chemicaliën komen de cel binnen om bevroren schade aan de voering te voorkomen. De cellen die in cryogene containers zijn opgeslagen, moeten bij het reanimeren met zorg worden behandeld. Wanneer de buis wordt verwarmd, doodt het resulterende ijskristal de cellen en kan het ongeval worden vermeden door een juiste werking.

Zolang het monster snel wordt ontdooid om het verlies aan vitaliteit te verminderen, is de praktijk: het verzegelde buisje snel in water van 37 graden C zetten, totdat al het ijs smelt, en dan de buis openen, de inhoud in het medium. Microben die bij ultra-lage temperaturen worden gehouden, moeten altijd worden opgeslagen in omgevingen met zeer lage temperaturen, dus er zijn tanks met vloeibare stikstof nodig. Er moet regelmatig aandacht worden besteed aan rehydratatie van vloeibare stikstof tijdens langdurige opslag-. Voor dit soort opslag is meer geld nodig dan voor vriesdrogen-, inclusief arbeid en vloeibare stikstof, die nodig zijn om de opslagtemperatuur op peil te houden.